Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 914-1 | ||||
Resumo:Microrganismos termófilos são capazes de sobreviver e reproduzir em ambientes com altas temperaturas. As plantas Senecio selloi (Spreng) Dc. (Asteraceae) e Sagittaria montevidensis Cham. & Schltdl. (Alismataceae), uma espécie de macrófita aquática encontrada em ambiente antropizado, tem ocorrência no Sul do Rio Grande do Sul, no Bioma Pampa. O objetivo deste estudo foi isolar microrganismos endofíticos, com potencial termofílico, dessas espécies vegetais. Foram isolados microrganismos da folha e do caule de Senecio selloi, e da folha + pecíolo, caule e raiz de Sagittaria montevidensis, que foram coletadas na Estação Experimental Terras Baixas da Embrapa Clima Temperado, Capão do Leão, RS, e depositadas na Coleção do Herbário da Embrapa Clima Temperado (ECT). As temperaturas médias das máximas do ambiente e do solo desnudo, durante o período da amostragem, foram de 31,1 ºC e 31,5 ºC, respectivamente. Foi realizada um desinfecção superficial [álcool 70% (2 min) + hipoclorito de sódio 2% (5 min) e água destilada estéril (10 min)] de porções de 10g de cada parte da planta e maceração em solução tampão fosfato (0,05M pH 7,0) e, então, realizou-se diluição seriada de 10-1 a 10-2, visando a obtenção de microrganismos endofíticos. De cada diluição, retirou-se alíquotas de 100 µL que foram plaqueadas, em duplicata, em placas de TSA 10% e 100%, por meio da técnica de espalhamento com alça de Drigalski, incubando-se a +40 °C por 24h. As colônias bacterianas com diferentes características morfológicas foram selecionadas e repicadas para novas placas contendo agar nutritivo, por meio da técnica de esgotamento, para o processo de purificação. Empregou-se o caldo EC (Escherichia coli) para verificação de bactérias coliformes. Os acessos selecionados (16) foram depositados na Coleção de Microrganismos Multifuncionais de Clima Temperado e receberam códigos CMM: 1219, 1220, 1221, 1222, 1223, 1224, 1225, 1226, 1227, 1229, 1230, 1231, 1232, 1233, 1234 e 1235. Os testes de caracterização morfológica (borda, cor, detalhes ópticos, elevação, forma, manifestação do crescimento, superfície, tamanho) e bioquímicos (endósporos, gram e king B) das colônias foram realizados de acordo com os Procedimentos Operacionais Padrão (POPs) do laboratório. Foram obtidos oito isolados de cada espécie, sendo cinco da folha e três do caule da Senecio selloi e um da folha + pecíolo, quatro do caule e três da raiz da Sagittaria montevidensis. Quanto aos caracteres morfológicos dos 16 acessos, as colônias apresentaram crescimento rápido (até três dias), tamanho entre 1 e 3mm, forma circular, elevação convexa e elevada, borda inteira e ondulada, superfície lisa e rugosa, detalhes ópticos translúcida, opaca e transparente e pigmentação branca e creme. Cinco isolados da planta Senecio selloi foram gram-positivos e três gram-negativos. Quatro isolados da planta Sagittaria montevidensis foram gram-positivos e quatro gram-negativos. Houve predominância de gram-positivos (56%). Um isolado da planta Senecio selloi é produtor de endósporo, indicativo de Bacillus sp. Todos os isolados apresentaram crescimento em King B sem formação do pigmento de fluorescência; cresceram a +40 ºC e apresentaram multiplicação rápida, sendo uma característica importante que pode enquadrá-los no grupo dos microrganismos termófilos. Palavras-chave: temperatura, plantas, microrganismo termófilo, taxonomia, identificação Agência de fomento:INCT- Microrganismos Promotores do Crescimento de Plantas Visando à Sustentabilidade Agrícola e à Responsabilidade Ambiental” – MPCPAgro - (CNPq 465133/2014-4, Fundação Araucária-STI, CAPES) |